Promocell培養(yǎng)基的管理與使用是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵之一，涉及儲(chǔ)存、配制、無(wú)菌操作、日常維護(hù)等多個(gè)環(huán)節(jié)。以下是詳細(xì)的規(guī)范和注意事項(xiàng)：

　　一、Promocell培養(yǎng)基儲(chǔ)存管理

　　1.溫度控制

　　未開封時(shí)：根據(jù)說(shuō)明書要求存放于2℃~8℃冰箱（冷藏），避免冷凍導(dǎo)致成分變性或沉淀析出。部分特殊培養(yǎng)基可能需要避光保存（如含血清或光敏感添加劑）。

　　已開封后：短期使用的瓶口需用75%酒精擦拭消毒，并盡快放回冰箱；長(zhǎng)期不用的剩余培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記開封日期，優(yōu)先使用舊批次以減少降解風(fēng)險(xiǎn)。

　　注意：反復(fù)凍融會(huì)破壞生長(zhǎng)因子活性，嚴(yán)禁將大包裝分裝后多次解凍！建議按實(shí)驗(yàn)需求量分裝成小管冷凍保存（-20℃），使用時(shí)單向融化取用。

　　2.有效期監(jiān)控

　　嚴(yán)格遵循包裝標(biāo)注的有效期限，過(guò)期產(chǎn)品即使未用完也不可繼續(xù)使用。若發(fā)現(xiàn)顏色異常、渾濁或沉淀增多，提前報(bào)廢處理。

　　對(duì)于添加了抗生素（如青霉素/鏈霉素）的培養(yǎng)基，更需關(guān)注有效期，因抗生素效力會(huì)隨時(shí)間下降。

　　3.防污染措施

　　儲(chǔ)存區(qū)域?qū)Ｓ糜谂囵B(yǎng)基存放，遠(yuǎn)離揮發(fā)性化學(xué)品、強(qiáng)酸強(qiáng)堿等污染物。不同種類的培養(yǎng)基分開放置，避免交叉混淆。

　　定期清理冰箱，丟棄廢棄容器并消毒貨架，防止霉菌滋生污染庫(kù)存。

　　二、Promocell培養(yǎng)基使用前準(zhǔn)備

　　1.預(yù)熱與平衡

　　從冰箱取出后置于室溫下回暖至約37℃（哺乳動(dòng)物細(xì)胞適用），或根據(jù)目標(biāo)細(xì)胞類型調(diào)整至適宜溫度。可直接水浴加熱但避免劇烈震蕩產(chǎn)生氣泡。

　　使用前輕輕顛倒混勻數(shù)次，確保添加物均勻分布（尤其含血清或碳酸氫鈉的培養(yǎng)基易分層）。

　　2.補(bǔ)充成分添加

　　血清/FBS：胎牛血清需滅活后按需比例加入（通常5%~20%），注意不同批號(hào)血清的性能差異可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性。

　　雙抗溶液：若基礎(chǔ)培養(yǎng)基不含抗生素，則每100mL添加1mL青鏈霉素混合液（終濃度約100U/mL）。

　　其他因子：如谷氨酰胺、丙酮酸鈉等不穩(wěn)定成分應(yīng)在臨用前現(xiàn)配，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露失效。

　　3.pH校準(zhǔn)驗(yàn)證

　　用精密pH計(jì)檢測(cè)調(diào)整后的酸堿度是否符合目標(biāo)范圍。可用CO培養(yǎng)箱內(nèi)的緩沖體系自然平衡，或微量滴加NaOH/HCl調(diào)節(jié)。

　　新舊培養(yǎng)基對(duì)比測(cè)試：觀察指示劑顏色變化判斷是否需要進(jìn)一步調(diào)校。

　　三、Promocell培養(yǎng)基無(wú)菌操作規(guī)范

　　1.生物安全柜內(nèi)作業(yè)

　　所有涉及開放瓶口的操作必須在層流超凈工作臺(tái)中進(jìn)行，包括倒取、移液、混合等步驟。操作前紫外照射30分鐘并開啟風(fēng)機(jī)運(yùn)行至少5分鐘驅(qū)散臭氧殘留。

　　穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備（實(shí)驗(yàn)服、手套、口罩），減少人為引入污染的風(fēng)險(xiǎn)。

　　2.避免微生物污染

　　嚴(yán)禁直接用手觸碰瓶口內(nèi)部，傾倒時(shí)傾斜瓶身讓液體沿壁流下，避免垂直倒入產(chǎn)生飛濺。吸管尖*不應(yīng)接觸瓶?jī)?nèi)未使用的液體部分。

　　每次取用后立即旋緊瓶蓋，并用70%酒精擦拭外表面消毒后再歸位。疑似污染的培養(yǎng)基應(yīng)立即高壓滅菌處理。

　　3.過(guò)濾除菌必要性

　　對(duì)于自制培養(yǎng)基或補(bǔ)充新鮮成分的情況，必須經(jīng)過(guò)0.22μm濾膜過(guò)濾除菌后方可使用。市售預(yù)混培養(yǎng)基通常已滅菌處理，但仍建議一次使用時(shí)做無(wú)菌測(cè)試（如涂布平板法確認(rèn)無(wú)雜菌生長(zhǎng)）。